亚洲一区二区三区激情在线-av一区二区三区日韩-色哟哟网站在线观看免费-精品国产国产综合精品

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章>水通道蛋白4 抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)標(biāo)準(zhǔn)操作流程
水通道蛋白4 抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)標(biāo)準(zhǔn)操作流程
更新時間:2018-08-30   點擊次數(shù):2115次

RSR AQP4Ab 抗體檢測試劑盒是世界上在該項目上同時獲得CE和美國FDA認證的產(chǎn)品,F(xiàn)DA 510(K)注冊編號:K161951; 中國CFDA注冊受理號:JSZ1800016

1.檢測前準(zhǔn)備工作:

(1)請確保試劑盒在使用前已在室溫環(huán)境下(20-25)回溫。

(2)核準(zhǔn)本次檢測涉及樣品數(shù),規(guī)劃好板面布局。

(3)使用剪刀或其他物品打開試劑盒內(nèi)微孔板的鋁箔包裝,取出微孔板,將本次檢測不涉

及的多余板條卸除,妥善放回鋁箔包中。鋁箔包內(nèi)應(yīng)放置隨裝的干燥劑并以膠帶封好開口,裝回自封袋中隨試劑盒冷藏保存。

(4)對空白孔做好標(biāo)記。

(5)取出試劑盒內(nèi)的濃縮洗液(concentrated wash solution),以純水十倍稀釋濃縮液??偭扛?/span>

據(jù)樣品數(shù)決定,手工洗板一般用量為500mL/半板。

(6)準(zhǔn)備一塊ELISA 微孔板蓋或若干ELISA 板封口膜。

(7)觀察樣品性狀。新鮮血清或凍存血清應(yīng)在室溫下保持澄清,如發(fā)現(xiàn)渾濁或溶血請在

13000RPM 下離心5 分鐘,并在接下來的檢測中只使用澄清部分。

2.檢測流程

(1)取出試劑盒內(nèi)的AQP4-生物素(AQP4-biotin)和復(fù)溶緩沖液(reconstitution buffer),每瓶凍

干粉使用移液器加入1.5ml 復(fù)溶緩沖液復(fù)溶。復(fù)溶瓶數(shù)根據(jù)本次檢測樣品量決定,每瓶生

物素可供50-55 孔使用,單次未使用完的已溶解生物素可在2-8℃中存放3 天。

(2)使用移液器向每孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品(Calibrator),對照品(Negative control&Positive

control)以及患者血清50uL。加樣順序中建議標(biāo)準(zhǔn)品按照先陰性質(zhì)控品、后標(biāo)準(zhǔn)品由低到

高順序加樣。

(3)除空白孔外使用移液器向每孔中加入25ul 復(fù)溶的AQP4-生物素

(4)完成加樣后蓋好微孔板蓋,將微孔板放置于酶標(biāo)板水平搖床上,按500 /分鐘頻率振

蕩總計兩小時。

(5)取出試劑盒內(nèi)的鏈霉親和素過氧化物酶(SA-POD)和稀釋液(diluent for SA-POD),按

照每0.1mlSA-POD 需加1.9ml 稀釋液進行二十倍稀釋。一般情況下完成整板檢測需用

0.6mlSA-POD 11.4ml 稀釋液。推薦使用單獨容器盛放稀釋后的SA-POD,非特殊情況不

推薦在SA-POD 瓶內(nèi)直接稀釋。

(6)完成孵育后將微孔板取下,打開板蓋,采取快速翻轉(zhuǎn)的方式將孔內(nèi)液體拍凈。使用洗

/多道移液器/洗板機抽取稀釋完成的洗液進行洗板,每孔洗滌三次。完成后將微孔板倒

扣在吸水紙上拍打以除去多余洗液。若采用自動洗板機則可設(shè)定抽取量1mL,加液量

300uL,振蕩3-5 秒,洗滌次數(shù)為3.

(7)除空白孔外每孔中加入稀釋好的SA-POD 100ul。蓋好板蓋室溫使用水平搖床500 /

振蕩20 分鐘。

(8)重復(fù)步驟6.如采用手工洗板,完成三次洗液洗板后追加一次純水洗板,用以除去泡沫。

(9)請注意:此步驟中包含空白孔。

使用移液器向每孔中加入100ul 顯色底物(TMB,棕色瓶),在避光處放置20 分鐘,請勿

振蕩。

(10)此步驟中包含空白孔。使用移液器向每孔中加入100ul 終止液(stop solution),可觀察

到顯藍色的微孔變?yōu)榱咙S。

(11)蓋好板蓋,使用水平搖床或手工振蕩微孔5 秒,保證微孔內(nèi)顯色過程充分停止。

3.讀數(shù)及數(shù)據(jù)處理

(1)讀數(shù)儀器的調(diào)整

檢測讀數(shù)需使用具有讀取特定波長的吸光度功能的儀器。推薦使用全波長酶標(biāo)儀或具備

450nm 405nm 濾光片的酶標(biāo)儀;本實驗推薦在檢測步驟9 時打開儀器預(yù)熱,以取得穩(wěn)

定的波長利于讀數(shù)。

(2)讀取吸光度

打開計算機,在控制軟件中打開已準(zhǔn)備好的讀板方案,在板面布局中按照本次檢測樣品數(shù)

目更改樣品布局。完成設(shè)定后點擊”Read”開始讀板。

(3)完成讀數(shù)后將結(jié)果按讀板方案中的報告單模板輸出至LIS 系統(tǒng),打印報告單。

4.檢測后工作

(1)讀數(shù)完畢的微孔板應(yīng)小心拆下已使用的板條,請勿將孔內(nèi)液體濺出。將已使用的板條

按醫(yī)療廢物處理。

(2)空板架使用*或其他方式妥善清潔后保存,推薦放回試劑盒微孔板的自封袋內(nèi)。

(3)本次檢測未使用干凈的復(fù)溶生物素及稀釋的SA-POD 可留作下次檢測使用,隨試劑盒其

他成分一并冷藏(2-8)貯存。

(4)洗液及濃縮洗液推薦冷藏貯存。

網(wǎng)站首頁 關(guān)于我們 新聞中心 產(chǎn)品中心 聯(lián)系我們
備案號:津ICP備18009176號-2   GoogleSitemap   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸
天津阿斯?fàn)柹锟萍加邢薰?sjhgq.com.cn) 版權(quán)所有 總訪問量:173641
新丰县| 新沂市| 赤壁市| 乐安县| 宝山区| 镇赉县| 贵州省| 恭城| 常德市| 遵化市| 泰来县| 土默特左旗| 邻水| 阳新县| 广饶县| 霍州市| 中宁县| 马山县| 韶关市| 洮南市| 息烽县| 武城县| 凤庆县| 新密市| 台东市| 青阳县| 来宾市| 志丹县| 东丰县| 绩溪县| 武夷山市| 铜梁县| 永德县| 四平市| 弋阳县| 郁南县| 井研县| 剑阁县| 津市市| 井冈山市| 福泉市|